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改良苯酚品紅染色

       改良苯酚品紅染液又稱(chēng)卡寶品紅(Carbol fuchsin)染色液、改良苯酚品紅染色液。該染色液與醋酸洋紅有相似之處,醋酸洋紅 是一種比較常用的堿性染料, 常用于細(xì)胞核染色、染色體的固定和染色。生物學(xué)上也常用卡寶品紅(Carbol fuchsin)作觀察細(xì) 胞分裂時(shí)染色體形態(tài)的染色劑。染色體染色時(shí)用醋酸洋紅染色液染色, 雖然染色效果較好, 但卻存在著染色需時(shí)較長(zhǎng)的問(wèn)題。 

       改良苯酚品紅染液常用于植物組織的壓片法和涂片法,染液穩(wěn)定。改良苯酚品紅染液采用改良配方,加入襯染劑,使染色效 果更佳。主要用于染色體染色如體細(xì)胞染色體和減數(shù)分裂染色,是很好的細(xì)胞核、線粒體染色劑。 

使用步驟(僅供參考): 

1.固定   將經(jīng)過(guò)預(yù)處理或沒(méi)有預(yù)處理的材料,放到卡諾氏固定液(3 份甲醇:1 份冰乙酸)中固定 2~24h,再分別在 95% 和 85%乙醇中各 30min ,再轉(zhuǎn)入 70%酒精中,可 4℃保存?zhèn)溆谩?nbsp;

2.解離   取固定好的植物組織,用蒸餾水漂洗 2~3 次,放入 1N HCl 溶液中 60℃水解 8~12min,再用蒸餾水洗凈。 

3.染色   將組織放在載玻片中央,用鑷子或解剖針將材料輕輕搗碎。滴加改良苯酚品紅染液,染色 8~15min 后,蓋上蓋玻片。 

4.壓片   在蓋玻片上面鋪上濾紙,固定好蓋玻片,用拇指垂直壓片,然后用鉛筆的橡皮頭輕輕均勻地敲打蓋片,至肉眼見(jiàn)材 料呈霧狀即可,使細(xì)胞核染色體分散。 

5.鏡檢觀察   顯微鏡下觀察染色形態(tài)和計(jì)數(shù),對(duì)典型分裂相細(xì)胞進(jìn)行攝影記錄。

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