實(shí)驗(yàn)技術(shù)原理：
細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA，RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調(diào)控基因表達(dá)、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等生物學(xué)試驗(yàn)中，其應(yīng)用越來越廣泛。
因?yàn)椴煌募?xì)胞在生理代謝及分裂上均存在差異，因此研究者將外源遺傳物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞的過程中需要選擇不同的方式。目前，將外源物質(zhì)導(dǎo)入細(xì)胞的方法主要分為三大類：
1、脂質(zhì)體（或是脂質(zhì)體替代物）轉(zhuǎn)染；
2、電轉(zhuǎn)；
3、病毒感染。
這三種方法互有優(yōu)劣。脂質(zhì)體或是脂質(zhì)體替代物轉(zhuǎn)染操作簡便，價(jià)格低廉，但是對細(xì)胞毒性大。而且，有些細(xì)胞通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率很低；電轉(zhuǎn)操作方便快捷，但是需要專門的儀器，對細(xì)胞損傷也比較大；病毒感染克服了前兩者的劣勢，感染效率高，對細(xì)胞毒性小，但是病毒前期包裝需要大量的時(shí)間和精力。
實(shí)驗(yàn)操作流程：
1、轉(zhuǎn)染試劑的準(zhǔn)備
a. 將400ul去核酸酶水加入管中，震蕩10秒鐘，溶解脂狀物。
b. 震蕩后將試劑放在－20攝氏度保存，使用前還需震蕩。
2、選擇合適的混合比例(1：1－1：2/脂質(zhì)體[1] 體積：DNA質(zhì)量)來轉(zhuǎn)染細(xì)胞。在一個(gè)轉(zhuǎn)染管中加入合適體 積的無血清培養(yǎng)基。加入合適質(zhì)量的MyoD或者EGFP的DNA，震蕩后在加入合適體積的轉(zhuǎn)染試劑，再次震蕩。
3、將混合液在室溫放置10-15分鐘。
4、吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，用PBS或者無血清培養(yǎng)基清洗一次。
5、加入混合液，將細(xì)胞放回培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一個(gè)小時(shí)。
6、到時(shí)后，根據(jù)細(xì)胞種類決定是否移除混合液，之后加入完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24－48小時(shí)。
客戶提供：
1、細(xì)胞株（可由我們代購）
2、轉(zhuǎn)染基因信息、載體、轉(zhuǎn)染細(xì)胞樣本、相關(guān)文獻(xiàn)和轉(zhuǎn)染基因。也可由我們設(shè)計(jì)并收費(fèi)合成含轉(zhuǎn)染基因的質(zhì)粒。
3、凍存細(xì)胞樣品，以干冰運(yùn)輸；培養(yǎng)細(xì)胞樣品，密封培養(yǎng)瓶灌滿生長培養(yǎng)基運(yùn)輸。
交付標(biāo)準(zhǔn)：
1、轉(zhuǎn)染細(xì)胞株
2、完整項(xiàng)目報(bào)告（材料、試劑、儀器、方法、數(shù)據(jù)分析、實(shí)驗(yàn)結(jié)果）
其他： 細(xì)胞轉(zhuǎn)染時(shí)DNA量如果比較多，轉(zhuǎn)染時(shí)培養(yǎng)基中如果有抗生素，是否會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
歡迎咨詢詳談，我們會(huì)根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
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