慢性腎盂腎炎動(dòng)物模型
實(shí)驗(yàn)方法
利用傾斜平板法制備100000000/ml及1000000/ml兩種濃度大腸埃希菌(O111B4)菌液待用，使用前測(cè)集落形成單位(CFU)值 核實(shí)濃度。體重200g左右雄性大鼠，術(shù)前常規(guī)禁水24h，先用細(xì)線扎住大鼠陰莖。在乙mi吸入麻醉下，動(dòng)物仰臥固定于手術(shù) 板上，常規(guī)消毒腹部皮膚并去毛，沿下腹部正中切開(kāi)，充分暴露左側(cè)輸尿管及膀胱，在輸尿管中段用10號(hào)半圓針、0號(hào)黑線 向側(cè)腹部穿針，暫不結(jié)扎。用注射器向膀胱內(nèi)注射100000000/ml濃度的菌液，每只注射量約0.5ml左右，常規(guī)手術(shù)關(guān)閉腹 腔。以適度松緊結(jié)扎側(cè)腹部黑線(24h后解除)，松開(kāi)扎住陰莖的細(xì)線，術(shù)后恢復(fù)正常飲水與進(jìn)食。分別于實(shí)驗(yàn)預(yù)定時(shí)間作腎 功能及血生化指標(biāo)測(cè)定；同時(shí)麻醉處死動(dòng)物，取兩側(cè)腎臟，一半組織經(jīng)固定液固定，作常規(guī)組織切片，光鏡下病理檢查；另 一半組織勻漿后作細(xì)菌培養(yǎng)。處死動(dòng)物前膀胱穿刺抽取尿液作細(xì)菌培養(yǎng)。
模型特點(diǎn)
模型動(dòng)物術(shù)后90d時(shí)，均表現(xiàn)為尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)/尿肌酐明顯升高；模型制作過(guò)程中，24h尿蛋白定量無(wú) 明顯增加。血肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)分別于30、60、90d檢測(cè)無(wú)明顯升高。術(shù)后第7日時(shí)，模型動(dòng)物膀胱尿標(biāo)本及左腎組 織細(xì)菌培養(yǎng)為陽(yáng)性，麥康凱培養(yǎng)基上為不透明紅色圓形菌落，血平板上則為稍凸、中等大小、邊緣整齊、不透明灰白色圓形 菌落；鏡下為革蘭氏染色陰性的粗短桿菌。細(xì)菌培養(yǎng)高陽(yáng)性率可持續(xù)保持到術(shù)后第60日。肉眼觀察第7日時(shí)模型動(dòng)物左側(cè)腎 臟明顯腫大，其表面可見(jiàn)粟粒樣膿腫，部分已融合成片；腎縱切面有膿腫形成；第15日時(shí)腎縱切面可見(jiàn)較多膿液，腎孟明顯 擴(kuò)張；第30日時(shí)腎臟腫脹部分減輕，外觀仍見(jiàn)膿腫；第60日腎臟體積腫大減輕；第90日時(shí)左腎可見(jiàn)明顯皮質(zhì)瘢痕形成，表 面凹凸不平，體積縮小。肉眼觀察未見(jiàn)右。腎有化膿灶或瘢痕形成，但可見(jiàn)右腎代償性增大。鏡下病理學(xué)觀察顯示，病變急 性期左腎腎盂黏膜上皮細(xì)胞壞死、脫落，腔內(nèi)積膿，腎實(shí)質(zhì)彌漫性化膿灶，小管腔內(nèi)可見(jiàn)白細(xì)胞管型；7～15d時(shí)淋巴細(xì)胞 浸潤(rùn)明顯；30d可見(jiàn)間質(zhì)纖維組織增生，腎盂處瘢痕形成；60d時(shí)部分腎小球出現(xiàn)纖維化；90d時(shí)可見(jiàn)間質(zhì)纖維化，并有灶性淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。
急性腎盂腎炎動(dòng)物模型
單純感染模型
實(shí)驗(yàn)方法
體重為200g左右大鼠，禁止飲水24h后，事先用細(xì)線扎住大鼠陰莖。在乙mi吸入麻醉下，動(dòng)物仰臥固定手術(shù)板上，常規(guī)消毒 腹部皮膚并去毛，沿動(dòng)物下腹部作正中剪開(kāi)，充分暴露膀胱，用注射器直接向膀胱內(nèi)一次性注射濃度為1000000/ml的大腸 埃希菌(O111B4)菌液，每只注射量約0.5ml，手術(shù)縫合切口，關(guān)閉腹腔。1h后松開(kāi)扎陰莖細(xì)線。術(shù)后恢復(fù)動(dòng)物正常飲水與進(jìn) 食。分別于預(yù)定時(shí)間處死動(dòng)物，取其兩側(cè)腎臟，小心去除腎包膜；然后縱向切開(kāi)腎臟，一半勻漿后行細(xì)菌培養(yǎng)，另一半置于 固定液中固定，作常規(guī)組織切片，HE染色，光鏡下觀察。同期膀胱穿刺作尿液細(xì)菌培養(yǎng)。
模型特點(diǎn)
術(shù)后3d尿液能培養(yǎng)出細(xì)菌，于麥康凱培養(yǎng)基上生長(zhǎng)出紅色圓形菌落；至7d時(shí)仍有80％的動(dòng)物細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性，15d時(shí)則僅有少 數(shù)動(dòng)物細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性。腎組織細(xì)菌培養(yǎng)大部分動(dòng)物雙腎細(xì)菌培養(yǎng)為陽(yáng)性，部分動(dòng)物為一側(cè)腎臟培養(yǎng)陽(yáng)性。至第15日時(shí)，仍有 少數(shù)腎臟細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性。大體標(biāo)本肉眼觀察可見(jiàn)模型動(dòng)物雙腎體積均有不同程度增大，腎表面無(wú)明顯膿腫；其縱切面可見(jiàn)腎 盂擴(kuò)張，黏膜充血，腎皮質(zhì)、髓質(zhì)分界不清。鏡下病理學(xué)觀察顯示，3d時(shí)腎盂黏膜下及間質(zhì)區(qū)以中性粒細(xì)胞為主伴有少量淋 巴細(xì)胞的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，毛細(xì)血管擴(kuò)張、充血，間質(zhì)水腫。第7日時(shí)腎盂黏膜下及間質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)淋巴細(xì)胞灶性浸潤(rùn)，并可見(jiàn)少 量嗜酸性粒細(xì)胞，間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張；至15d時(shí)仍可見(jiàn)間質(zhì)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)，毛細(xì)血管增生、擴(kuò)張，并有少量纖維母細(xì)胞、肉 芽組織形成。
手術(shù)+感染模型
實(shí)驗(yàn)方法
大腸埃希菌(O111B4)菌液的制備：將菌種接種于肉湯培養(yǎng)基，37℃、5％CO2孵箱內(nèi)孵育12h，利用傾斜平板法制備 1000000/ml濃度菌液待用。體重為200g左右雄性大鼠，禁止飲水18h后經(jīng)腹腔按30mg/kg體重劑量注射戊巴bi妥鈉麻醉。動(dòng) 物仰臥固定手術(shù)板上，常規(guī)消毒腹部皮膚并去毛，鋪無(wú)菌手術(shù)巾。沿下腹部作長(zhǎng)約2cm正中切口，逐層切開(kāi)腹壁進(jìn)入腹腔， 充分暴露左側(cè)輸尿管及膀胱；用4號(hào)縫合絲線從中段輸尿管兩旁分別向側(cè)腹部穿針并引出縫合線，兩針盡量保持相近，暫不 結(jié)扎，用動(dòng)脈夾夾閉陰莖，用 TB針向膀胱內(nèi)緩慢注入0.75ml菌液。然后拉緊腹壁外面的縫合線兩端，以適當(dāng)松緊度“結(jié)扎” 輸尿管。逐層縫合腹壁切口，松開(kāi)陰莖動(dòng)脈夾，術(shù)后動(dòng)物恢復(fù)常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水和進(jìn)食。手術(shù)后20h，拆去腹壁外面輸尿 管結(jié)扎線，使輸尿管重新開(kāi)放。分別在規(guī)定的時(shí)間用動(dòng)脈夾夾住大鼠陰莖后，用乙mi麻醉，仰臥于手術(shù)臺(tái)上，無(wú)菌條件下開(kāi) 胸、開(kāi)腹，抽出心血和尿液，切取左右腎臟和脾臟，作肉眼檢查、細(xì)菌培養(yǎng)及病理組織學(xué)檢查。
模型特點(diǎn)
術(shù)后第3日模型動(dòng)物膀胱尿液即能培養(yǎng)出細(xì)菌，于麥康凱培養(yǎng)基上生長(zhǎng)出紅色圓形菌落。第7日時(shí)細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性率分別可高達(dá) 80％以上，這種高陽(yáng)性率可持續(xù)保持15d以上。結(jié)扎一側(cè)腎臟腎組織細(xì)菌培養(yǎng)也有細(xì)菌生長(zhǎng)，未結(jié)扎一側(cè)腎臟細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性 少見(jiàn)，且持續(xù)時(shí)間較短。心血和脾臟細(xì)菌培養(yǎng)均為陰性。肉眼觀察模型動(dòng)物左腎體積較右腎有不同程度增大，左腎表面可見(jiàn) 數(shù)量不等的微小膿腫，個(gè)別腎臟有突出腎表面的較大膿腫；切面腎盂擴(kuò)大，黏膜充血、腫脹，腎盂內(nèi)有膿性分泌物，有的腎 切面可見(jiàn)微小膿腫或錐形炎癥灶。右腎外觀和切面未見(jiàn)明顯異常。鏡下病理觀察顯示，術(shù)后3d模型動(dòng)物左腎腎盂腎盞黏膜充 血腫脹，有的可見(jiàn)黏膜表面有局灶性膿性分泌物，黏膜下可見(jiàn)大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。腎間質(zhì)血管充血，多數(shù)腎臟可見(jiàn)膿腫， 在一些腎乳頭部尚可見(jiàn)大小不一的錐形炎癥灶；腎小管不同程度擴(kuò)張，以遠(yuǎn)曲小管為重；小管周圍有較多中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)， 部分腎小管上皮細(xì)胞壞死、脫落，管腔內(nèi)可見(jiàn)膿細(xì)胞及少量管型。腎小球無(wú)明顯損傷。術(shù)后7d動(dòng)物左腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞減少， 腎盂黏膜下、腎小管周圍可見(jiàn)以中性粒細(xì)胞為主，伴有較多淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；膿腫灶邊緣出現(xiàn)較多成纖 維細(xì)胞，灶內(nèi)除有中性粒白細(xì)胞外，尚有大量淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞。腎盂黏膜充血腫脹減輕，黏膜下中性粒細(xì)胞細(xì)胞浸潤(rùn)明 顯減少，出現(xiàn)較多單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞。右腎組織無(wú)明顯組織形態(tài)學(xué)改變。
需確認(rèn)的信息
1. 模型種屬（大鼠還是小鼠或是其他種屬）
2. 動(dòng)物體重有無(wú)要求，年齡有無(wú)要求
3. 雌雄有無(wú)要求
4. 模型構(gòu)建具體方案
5. 取材要求（采血、取組織樣本）
收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：
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